《定向进化冰片脱氢酶提高其对樟脑的催化效率》作者：胡小祥 邓华祥 蔡宇杰【PDF】

书呆熊

定向进化冰片脱氢酶提高其对樟脑的催化效率
胡小祥1，邓华祥2，蔡宇杰1
（1.江南大学生物工程学院，214122；
2.吉林大学食品科学与工程学院，130062）
摘要：为了获得能够高效催化樟脑到冰片的酶，本研究基于AlphaFold2对Arabidopsislyrate的冰片脱氢酶（Borneoldehydrogenase,AIBDH）进行三维结构预测，将酶分子和底物进行半柔性分子对接后通过点突变和组合突变获得了催化效率明显提升的突变体，其中三突变体
V164A/201H/A156T的活力达到野生型的529%。酶动力学参数测定结果显示，三突变体的底物亲和力提升了1.6倍，催化效率提升了9.3倍。结构分析证实，三突变体使得催化残基S155、Y168和底物与NADPH的距离缩短，从而使得反应更易发生。转化率实验表明，三突变体V164A/1201H/A156T在3.5h内能够在对50mM底物下转化率达99.6%。这些结果证明了AIBDH具有工业生物催化应用潜力，为冰片的单酶催化来源提供了基础。
关键词：冰片脱氢酶；定向进化；催化机理
中图分类号：Q81

chenvenvei

樟脑用处还是挺大的，可以有效防虫

烟雨红尘

看到三突变体的底物亲和力确实提升了